高效液相谱在使用过程中常会出现一些影响分析结果的问题,如果使用人员了解常见问题及其成因和相关解决方法,就能做到早预防勤维护,使分析结果保持较好的稳定性与较高的精确性。
高效液相谱仪的漂移问题主要包括基线漂移和保留时间漂移。
基线漂移
一般说来,机器刚起动时,基线容易漂移,大概要半个小时的平衡时间,如果你用了缓冲溶液或缓冲盐,还有就是在低波长下(220 nm)平衡时间相对会比较长,但如果你在实验过程中发现基线漂移,则你要考虑下面的原因:
1)柱温波动。解决方法:控制好柱子和流动相的温度,检查是否有打开的窗户或空调对着柱温箱;
2)流通池被污染或有气体。解决方法:用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池(最好断开柱子)。如有需要,可以用1N的硝酸(不要用盐酸);
3)紫外灯能量不足。解决方法:更换新的紫外灯;
4)流动相污染、变质或由低品质溶剂配成。
解决方法:检查流动相的组成,使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂;
5)样品中有强保留的物质(高K’值)以馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。
解决方法:使用保护柱,如有必要,在进样之间。在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子;
6)检测器没有设定在最大吸收波长处。解决方法:将波长调整至最大吸收波长处;
7)流动相的PH值没有调节好。解决方法:加适量的酸或碱调至最佳PH值。
保留时间漂移
汽车怎么漂移 保留时间重现是液相性能好坏的一个重要标志,同一种东西,两次的保留时间相差不要超过15 s,超过了半分钟可看做保留时间漂移,就无法进行定性,你要考虑以下原因:
1)温控不当。解决方法:调好柱温,检查是否有打开的窗户或空调对着柱温箱;
2)流动相比例变化。解决方法:检查四元泵的比例阀是否有故障;
3)谱柱没有平衡。解决方法:在每一次运行之前给予足够的时间平衡谱柱;
4)流速变化。解决方法:重新设定流速 ;
5)泵中有气泡。解决方法:从泵中除去气泡 。
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